《表1 引物序列及产物片段大小》

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《外周血环状RNA circDLGAP4在冠心病中保护的作用》

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引物由中国擎科生物公司采用Primer Premier 5.0软件设计并合成。GenBank中circDLAGP4的序列号为NM＿183006，以GAPDH作为内参基因。引物序列见表1。荧光定量PCR反应体系为20μL，包括SYBR Green RT-qPCR专用预混液（SYBR Green Master Mix）10μL，10μmol/L上、下游引物各1.0μL，cDNA 2.0μL，ddH2O 6.0μL。循环参数:95℃变性5 min；95℃30 s，60℃30 s，72℃30 s，45个循环。由荧光定量PCR仪自带Bio-Rad CFX manager软件于81.5℃收集荧光信号并进行熔解曲线分析。每个cDNA样本设置2个复孔，保证复孔间Ct值相差小于0.5，取均值。采用2-ΔCt法计算相对表达水平。公式:ΔCt=Ct（circDLGAP4）-Ct（GAPDH）。