《表1 DKK-1引物序列和产物片段大小》

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《子宫颈脱落细胞DKK-1基因启动子甲基化在子宫颈鳞癌中的临床意义研究》

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注：M为甲基化，U为非甲基化

根据DNA提取试剂操作说明提取子宫颈鳞癌组和对照组子宫颈脱落细胞总DNA。采用MSP法检测DKK-1基因启动子甲基化，用亚硫酸氢钠修饰提取后的DNA，再经回收试剂盒回收后，进行后续PCR步骤。使用Meth Primer 2.0 Primer Design设计甲基化修饰引物，引物序列见表1。PCR反应体系为25μL；循环条件：95℃预变性5 min，94℃变性30 min，64℃退火30s，72℃延伸30 s，共35个循环，最后72℃延伸10 min。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后检测。