《表1 q PCR所用引物序列》

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《SIRT5对高糖环境下结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响及机制探讨》

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复苏培养高糖环境下各组Lovo细胞，分组同1.2.1高糖培养基分组，待细胞融合度达90%时，Trizol裂解，提取总RNA，测定浓度，以1μg RNA为模板，选取反转录引物，利用反转录酶合成c DNA，1∶100稀释合成的c DNA，取1μLc DNA组成12μL反应体系（SYBR Premix EX taq 6.0μL，上游引物（5μmol/L)0.5μL，下游引物（5μmol/L)0.5μL，c DNA1.0μL，无核酸酶水4.0μL)，q PCR检测高糖环境下各组Lovo细胞SIRT5、m TOR、HIF-1α、PKM2及HK2 m RNA的相对含量，并制作熔解曲线，GAPDH为内参，引物序列见表1。反应过程：95℃30 s；95℃5 s，60℃30 s，40个循环；95℃15 s，60℃1 h，95℃15 s。采用相对定量的2-??Ct法进行数据分析。