《表1 PCR所用引物序列、片段大小》

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《新疆哈萨克族食管癌FHIT基因和MGMT基因启动子区CpG岛甲基化程度及临床意义》

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PCR反应利用引物在线Prim‐er5软件进行设计（http://frodo.wi.mit.edu/cgi‐bin/primer3/primer3＿www.cgi）。设计多个片段的引物，引物对甲基化目的序列实现扩增（部分引物见表1）。基因的CpG岛用在线软件确定（http://emboss.bioinformatics.nl/cgi‐bin/emboss/cpgplot）。PCR反应中FHIT和MGMT引物参考表1。反应体系均为20μL:1×HotStarTaq缓冲液，2.0mmol/L Mg2+，0.2 mmol/L dNTP，0.2μmol/L引物，1 U DNA聚合酶和1μL DNA模板。反应条件:FHIT:95℃，15 min；94℃，20 s循环11个周期，59.5℃40 s，72℃，1 min；MGMT:94℃，20 s循环24个周期，54℃，30 s，72℃，1 min，72℃，2 min。