《表1 PCR反应引物及目的片段大小》

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《浦口某养殖场气单胞菌的分离鉴定和耐药特性分析》

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按试剂盒说明书，提取细菌基因组DNA，作为扩增看家基因gyr B的DNA模板。采用gyr B种特异性引物[10]（见表1），对分离菌株的gyr B基因片段进行扩增。引物由宝生物工程（大连）有限公司合成，根据合成引物的OD值和1 OD引物的分子数（nmol），将引物稀释为10 pmol，–20℃保存备用，反应体系为25μL，包括:Mix 12.5μL，上下游引物（10 pmol）各1μL，模板1μL，用dd H2O调整终体积至25μL。反应参数为94℃预变性2min，94℃变性30 s，64℃退火30 s，72℃延伸60 s，共进行30个循环，最后72℃延伸10 min。