《表1 耐药基因名称、PCR引物序列及目的片段大小Tab.1 Name of drug resistance gene, premer sequence of PCR and objective fr

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《纹带棒状杆菌临床分离株分子分型和耐药性分析》

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用加热煮沸法提取纹带棒状杆菌细菌DNA，PCR扩增6种常见氨基糖苷修饰酶类耐药基因，包括aph（3''）-Ib、aph（6）-Id、aac（6'）-Ib、aph（3'）-IIIa、aadA、AAC（6'）-Ie-APH（2''）-Ia；5种产碳青霉烯酶基因:blaIMP、blaVIM、blaOXA-48、blaNDM、blaKPC；1种MLSB类耐药基因ermX以及两种四环素耐药基因:tetW、tetL。引物设计见表1，由北京擎科新业生物技术有限公司合成。PCR总反应体系25μL:DNA模板1μL，上、下游引物（10μmol/L）各1μL，2×PCR Master 12.5μL，ddH2O 9.5μL。PCR扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳后，用紫外凝胶成像与分析系统观察结果，阳性产物送北京擎科新业生物技术有限公司双向测序，测序结果用BLAST进行序列比对。