《表1 实验用各引物序列与片段大小Tab.1 Sequence of primers for real-time PCR and the length of the products》
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6孔板每孔接种1×106细胞,干预6 h;弃上清,PBS洗涤细胞后,每孔加1 m L TRIzol完全裂解细胞,氯仿抽提,异丙醇沉淀,离心静置,提取总RNA,紫外分光光度计测定浓度及纯度;应用Ta Ka Ra RR047A试剂盒,逆转录RNA为c DNA;应用Ta Ka Ra RR820A试剂盒进行q PCR定量分析,引物序列见表1。扩增条件:95℃、3min;95℃、10 s,60℃、30 s,40个循环。本实验设定β-actin为内参照。引物由大连宝生物工程公司合成,具体序列见表1。根据得到的Ct值,用2-△Ct法计算基因表达量。
图表编号 | XD0016635400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.06.20 |
作者 | 殷商启、朱俊宇、罗莉、杨霞、梁华平、罗艳 |
绘制单位 | 重庆医科大学附属第一医院检验科、陆军军医大学大坪医院野战外科研究所、、创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室、陆军军医大学大坪医院野战外科研究所、、创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室、四川大学华西医院临床药学部、陆军军医大学大坪医院野战外科研究所、、创伤烧伤与复合伤国家重点实验室第一研究室、重庆医科大学附属第一医院检验科 |
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