《表1 Real-time PCR引物序列Tab.1 Sequences of primers for real-time PCR》

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《全反式维甲酸诱导肝癌细胞Hepa1-6成熟和分化过程中的自噬》


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ATRA处理7 d后检测肝细胞相关标志蛋白基因水平的表达情况。试剂盒提取出各组细胞的总RNA,并逆转录成c DNA。使用Primer3程序设计相关基因的引物(表1)。c DNA样品稀释10倍后进行Real-time PCR扩增:72℃3 min;94℃3 min;94℃10 s,55℃20 s,72℃20 s,共40个循环;溶解曲线65℃~95℃,每5 s增加0.5℃,读板。所有样本通过β-actin的表达水平进行标准化。