《表2 引物序列Tab.2 Sequences of primers for real-time PCR》
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《miR-378a-5p下调人肝脏星形细胞系LX-2中鞘胺醇激酶1的表达》
PCR:polymerase chain reaction;Sph K1:sphingosine kinase 1;TNF-α:tumor necrosis factor-α.
采用RNA提取纯化试剂盒(Gene JET RNA Purification Kit)提取细胞RNA。检测定量后取1μg RNA进行反转录(不加反转录酶作为阴性对照,即NoRT)。采用反转录后的c DNA原液进行相应倍数的稀释,进行qPCR。该过程中使用的引物序列见表2。检测的临界点设定在PCR扩增过程中,荧光信号由本底进入指数增长阶段的拐点所对应的循环数(Ct)作为模板初始浓度的间接指标,熔解曲线分析采用默认条件。结果以18S rRNA进行校正,用ΔΔCt法计算相对基因表达量。
图表编号 | XD0040172100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.02.21 |
作者 | 祁长波、常娜、杨琳、李丽英 |
绘制单位 | 首都医科大学细胞生物学系‘肝脏保护与再生调节’北京市重点实验室、首都医科大学细胞生物学系‘肝脏保护与再生调节’北京市重点实验室、首都医科大学细胞生物学系‘肝脏保护与再生调节’北京市重点实验室、首都医科大学细胞生物学系‘肝脏保护与再生调节’北京市重点实验室 |
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