《表1 SYBR Real-Time PCR反应引物序列Tab.1 the primer sequences of SYBR Real-Time PCR reaction》

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《鸡柔嫩艾美尔球虫对免疫细胞体外增殖及产生的免疫相关分子的影响》

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（2） 引物的合成及反转录。引物根据GenBank中的序列用Primer5.0软件设计，见表1。取PCR管置于冰上，分别加入RNA模板3μL、Oligo（dT）18 1μL、Rtase 0.8μL、5xRTRraction Mix 4μL、Rnase free H2O补齐20μL，混匀后离心，置于PCR仪，PCR反转录反应条件为:42℃50min、65℃15min、4℃维持，反应结束后得第一链产物cDNA，-80℃保存备用。