《表1 PCR引物序列Tab.1 The sequence of the primers of PCR》

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《基于SIRT1/TGF-β_1/Smad通路研究三七皂苷对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞EMT的影响》


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收集细胞,按照Trizol试剂说明书提取细胞总RNA,检测并计算RNA的纯度和浓度,使用逆转录试剂盒转录为c DNA,用SYBR Green荧光法进行PCR扩增。PCR引物序列由上海生工生物工程公司合成,具体序列见表1。反应条件:95℃预变性10min,95℃变性15s,60℃退火延伸1min,共40个循环。每个样本设置3个复孔。取其循环阈值(Ct)均值,计算各组的△Ct,以2-△△Ct表示基因的相对表达量(△Ct=目的基因Ct值-内参基因Ct值,△△Ct=各实验组△Ct值-正常对照组△Ct值)。