《表1 PCR引物序列Tab.1 Sequences of primers used for PCR》

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《Ezrin增强子敲除可抑制人食管癌Eca-109细胞的增殖和迁移》


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选取10个单细胞克隆,提取基因组DNA,以表1中的序列F-EZR-L1和R-EZR-R1为引物进行第一轮PCR,以F-EZR-L2和R-EZR-R2为引物进行巢式PCR,反应条件:94℃1 min;40×(98℃10 s,58℃15s,68℃90 s);68℃5 min。将获得的巢式PCR产物直接进行测序,根据测序结果选择单克隆细胞株做进一步亚克隆测序分析。在已经测序鉴定的已敲除ezrin增强子的单细胞克隆中选取一个进行ezrin基因表达、细胞增殖和迁移能力检测。本研究中,将ezrin增强子敲除细胞株命名为Eca-C2。