《表1 各引物序列信息Tab.1 Sequence of primers used for q RT-PCR》

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《miR-144-3p在大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达及其靶向调控作用》

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按照ABI的Taq Man®；Micro RNA Reverse Transcription kit试剂盒操作说明书，对抽提的RNA进行体外反转录实验，得到c DNA产物；反应条件为:16℃，孵育30 min，42℃孵育30 min，85℃加热5 min，4℃保存。以得到的c DNA为模版，进行荧光定量PCR，采用Taq Man®；Universal PCR Master Mix 20μL反应体系，在罗氏Light Cycler480仪器上操作，以U6作为表达检测的内参，?CT表示mi R-144-3p的相对表达，其中?CT=CTU6-CTmi R-144-3p，Runx2的相对表达量为?CT=CTβ-actin-CT Runx2，Smad4的相对表达量为?CT=CTβ-actin-CT OCN，反应条件为:95℃，预变性10 min；95℃15 s，60℃30 s，70℃30 s进行40个循环的扩增，引物信息见表1。