《表1 引物序列Tab.1 The sequence of primers》

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《芒果无机焦磷酸酶基因的克隆及其表达载体构建》


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注:下划线为酶切位点。Note:The underline is the restriction site.

采用SMARTerTM RACE cDNA Amplification Kit(Clontech)试剂盒以贵妃芒果果实总RNA为模板合成目的基因MiPPase的第一链的cDNA序列,然后分别扩增MiPPase的3′端和5′端序列,连接到pMD-19T克隆载体上,转化到DH5α大肠杆菌感受态,挑取阳性菌落送测序,根据测序结果拼接目的基因的cDNA全长,再设计含有酶切位点的特异引物(表1)扩增获得MiPPase基因的cDNA全长序列。