《表1 q PCR引物Tab.1 Primers used for q PCR》
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《汞镉联合暴露对斑马鱼性腺组织学和抗氧化酶基因表达的影响》
基因的表达水平采用荧光定量PCR(q PCR)方法检测。使用RNAiso Plus从样品中提取总RNA,具体步骤按说明书进行。经Nanodrop ND-2000分光光度计检测总RNA的浓度和OD260/OD280后,取1μg总RNA用Prime ScriptRT试剂盒进行逆转录。q PCR在CFX96实时定量PCR仪上进行,反应体系为10μL,包含SYBR Premix Ex TaqTM5μL,10μmol·L-1正反向引物各0.4μL,10倍稀释的c DNA模板1μL,以及RNasefree H2O 3.2μL。引物序列见表1。q PCR的扩增条件为:95℃预变性30 s;95℃变性5 s;60℃退火30 s,72℃延伸30 s,40个循环。选取ef1α作为内参基因,目的基因与ef1α的相对表达水平用2-ΔΔCt公式计算。
图表编号 | XD0011607600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.05.25 |
作者 | 梁晓敏、曾凤、张群芳、李英文、田盛君、陈启亮 |
绘制单位 | 重庆师范大学生命科学学院重庆市高校动物生物学重点实验室、重庆师范大学生命科学学院重庆市高校动物生物学重点实验室、重庆师范大学生命科学学院重庆市高校动物生物学重点实验室、重庆师范大学生命科学学院重庆市高校动物生物学重点实验室、重庆市长寿区水产技术推广站、重庆师范大学生命科学学院重庆市高校动物生物学重点实验室 |
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