《表1 qRT-PCR引物序列Tab.1 Primers used for qRT-PCR》
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《影响金黄色葡萄球菌杀白细胞素ED转录表达的培养条件》
收集TSB、BHI、YCP、MHB和LB五种培养基中对数生长早期(TSB、BHI、YCP和MHB为3h,LB为5h)、中期(TSB、BHI和YCP为4h,MHB为5h,LB为7h)、晚期(TSB、BHI和YCP为5h,MHB为7h,LB为9h)及平台期(TSB、BHI和YCP为7h,MHB为9h,LB为11h)菌液,4℃,12 000r/min离心10min,弃上清液,用含100μL裂解液、10μL蛋白酶K和10μL溶葡萄球菌酶的溶液重悬菌体,56℃裂解1 h。用MiniBEST Universal RNA Extraction Kit提取细菌RNA,去除基因组DNA后,反转录为cDNA。以16SrRNA为内参基因,qRT-PCR测定lukE基因mRNA表达(TB Green Premix Ex Taq)(LukED由共转录于一条mRNA的lukE和lukD两个基因编码,因此检测lukE基因可反映lukED的表达) 。引物序列见表1[18-19]。
图表编号 | XD0043788000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.02.25 |
作者 | 杨涵、黄凯峰、徐溯、赵焕强、徐晓刚、胡付品、何春燕、龚芳、刘庆中 |
绘制单位 | 上海交通大学附属第一人民医院检验医学中心、上海交通大学附属第一人民医院检验医学中心、复旦大学附属华山医院抗生素研究所、上海交通大学附属第一人民医院检验医学中心、复旦大学附属华山医院抗生素研究所、复旦大学附属华山医院抗生素研究所、上海交通大学附属第一人民医院检验医学中心、南通大学附属南通第三医院检验科、上海交通大学附属第一人民医院检验医学中心 |
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