《表1 扩增引物Tab.1 Primers used for amplification》

《表1 扩增引物Tab.1 Primers used for amplification》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《弓形虫子孢子抗原SporoSAG基因缺失虫株的构建》


  1. 获取 高清版本忘记账户?点击这里登录
  1. 下载图表忘记账户?点击这里登录

在gRNA在线设计网站(网址http://www.ecrisp.org/E-CRISP/designcrispr.html)设计特异性打靶该基因的gRNA(见表1)。以实验室已有的p SAG-Cas9-TgU6-ccdb-sgMIC3质粒[7]为模板构建该质粒,引物为gRNA-SporoSAG-Fw和gRNA-CRISPR-Rv,利用Q5点突变试剂盒对模板质粒进行突变,构建打靶SporoSAG的CRISPR质粒。对改造后的质粒进行酶切鉴定,用Sal1进行酶切后,构建正确的CRISPR质粒会被切为大小分别为6 kb、3.7 kb的两个片段。