《表1 扩增引物Tab.1 Primers used for amplification》
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《弓形虫子孢子抗原SporoSAG基因缺失虫株的构建》
在gRNA在线设计网站(网址http://www.ecrisp.org/E-CRISP/designcrispr.html)设计特异性打靶该基因的gRNA(见表1)。以实验室已有的p SAG-Cas9-TgU6-ccdb-sgMIC3质粒[7]为模板构建该质粒,引物为gRNA-SporoSAG-Fw和gRNA-CRISPR-Rv,利用Q5点突变试剂盒对模板质粒进行突变,构建打靶SporoSAG的CRISPR质粒。对改造后的质粒进行酶切鉴定,用Sal1进行酶切后,构建正确的CRISPR质粒会被切为大小分别为6 kb、3.7 kb的两个片段。
图表编号 | XD0032680100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.04.01 |
作者 | 侯伦、申邦、田发益 |
绘制单位 | 西藏农牧学院动物科学学院、华中农业大学动物医学院、华中农业大学动物医学院、西藏农牧学院动物科学学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |