《表1 qRT-PCR引物表Tab.1 Primers used for qRT-PCR》

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《水稻OsNCED3基因突变延缓叶片衰老》


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野生型水稻苗在16h光照/8h黑暗,28℃条件下培养至两周,分别选用20%PEG8000,150mmol NaCl,20μmol/L ABA处理0h、2h、4h、8h、12h以及24h,用qRT-PCR方法检测OsNCED3基因的表达量(用TRIzol法提取经过不同处理水稻叶的总RNA,用TaKaRa Prime Script RT reagent Kit with gDNA Eraser逆转录试剂盒进行基因组的清除和逆转录,采用SYBR Premix EX Taq (TaKaRa code No.RR420A)进行qPCR扩增,仪器为MyiQ2real-time PCR detection system(Bio-Rad,www.biorad.com),OsActin为内参基因,qRT-PCR程序:95℃(3min);94℃(10s),55℃(20s),40个循环.反应完成后,利用2-ΔΔCT方程进行相对定量分析,每个样本3次生物性重复) .目的基因和内参基因引物详见表1.