《表1 qRT-PCR引物序列Tab.1 Sequences of primers for qRT-PCR》
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《慢病毒介导神经生长因子过表达诱导脐带间充质干细胞向神经元样分化》
收集细胞,Trizol法提取总RNA,取2μl RNA酶标仪测定RNA溶液浓度,采用逆转录试剂盒,管中加入4μl 5×iScript Reaction Mix、1μl iScript Reverse Transcriptase、1μg RNA以及RNase free ddH2O至20μl。在PCR仪上进行逆转录反应:25℃5min,46℃20min,95℃1min。取反转录得到的cDNA各2μl作为模板,分别10μmol/L引物1μl(引物序列见表1),2×iTaqTM universal SYBR@Green supermix10μl,ddH2O 7μl,95℃5s,60℃30s,40个循环,PCR仪上进行扩增。每个样品的Ct值从内参基因的值中减去得到ΔCt,然后比较2-ΔΔCt值。
图表编号 | XD0020321700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.10.20 |
作者 | 陈浩浩、郑群、王文倩、江文娇、王飞凤、傅晓艳、张宁 |
绘制单位 | 金华市思丹姆干细胞生物科技有限公司、金华职业技术学院医学院分子生物学实验室 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |