《表3 qRT-PCR所用引物序列Tab.3 Primer sequences used in qRT-PCR》

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《拟南芥光敏色素作用因子PIF3节水抗旱功能分析》


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通过荧光定量PCR检测分析转基因过表达纯合系和突变体中的PIF3表达水平(表3)。qRT-PCR反应体系为20μL,其中模板cDNA 1μL,Faststart SYBR Green Master(ROX)10μL,引物各0.8μL,双蒸水7.4μL。反应程序:94℃预变性5min;94℃变性15s,60℃复性20s,72℃延伸及读取荧光值31s,40个循环;65~95℃溶解曲线分析,每1℃持续1s。用7300Real-Time PCR仪美国ABI公司进行实时荧光定量PCR,并用仪器自带的软件对试验结果进行分析。