《表1 质粒改造使用的引物及序列表Tab.1 Primer sequences used in plasmid modification》

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《单质粒哺乳动物单杂交系统的构建及功能评价》


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通过如表1所示不同的引物组合(引物中的Bam HI酶切位点以下划线形式标出),将p G5luc载体(见图1 (a)) 中的GAL4结合序列(简称“G”)、萤火虫荧光素酶基因(简称“F”)连同位于二者上下游的两个调控序列(上游调控序列,简称“U”;下游调控序列,简称“S”)分别扩增,形成不同长度的调控与功能序列组合,以Bam HI酶切后连接至p Bind载体(见图1 (b)) 中的Bgl II酶切位点处(Bam HI与Bgl II为同尾酶).为便于活性比较,转化后仅筛选连接后正向引物靠近p BR3322位点而反向引物靠近CMV启动子位点的转化子做进一步测序及后续研究.