《表1 引物序列Tab.1 Primer sets used in the present study》

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《雌激素受体α抑制剂MPP在小鼠囊胚形成和滋养层干细胞中影响YAP核定位》


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分别收集各组小鼠桑葚胚(或TSCs细胞),用DEPC处理过的0.3%PVP-PBS洗涤3次后,每40枚桑葚胚(或六孔板TSCs细胞)置于装有400μl RNA Lysis Buffer离心管中。根据Quick-RNA TM MicroPrep R1050试剂盒说明书提供的方法提取总RNA。用NanoDrop ND-1000(NanoDrop,USA)检测RNA的浓度和纯度。根据Reverse Transcription Kit试剂盒说明书,使用PCR仪合成cDNA。PCR引物序列信息列于表1(桑葚胚和TSCs细胞的Real Time-PCR实验分别采用H2afz和GAPDH基因为内参)。在Real Time-PCR扩增仪上采用SYBR?PremixEx TaqTM进行扩增,反应条件设置为95°C,10min,1个循环,95°C,15s,40个循环,60°C,1min,40个循环。实验重复3次以上。