《表1 RT-PCR扩增引物序列Tab.1 Primer sequences used in RT-PCR》

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《Indian Hedgehog表达量在大鼠骨关节炎早期变化的研究》

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5.RT-PCR检测:液氮条件下研磨软骨组织为粉末状，trizol法提取细胞总RNA，Nano Drop 2000检测RNA量和纯度。用逆转录试剂盒（Prime ScriptTM RT Master Mix Takara）将RNA逆转录为25μl体系的c DNA，以5μl分装保存。以c DNA为模板，利用扩增试剂盒（SYBR Premix Ex Taq TM II Takara）进行PCR扩增反应，BIO-RAD IQ5软件分析结果。扩增引物见表1，扩增条件如下:预变性95℃10 min；接着40个循环:95℃10 s、59℃30 s、72℃30 s，退火温度因基因调整，各样本设2个副孔，m RNA相对表达量用2-ΔΔCt表示。