《表1 基因引物序列Tab.1 Sequences of primers of RT-PCR》

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《Exendin-4对胰岛素抵抗人肝癌HepG_2细胞脂代谢相关因子基因表达的影响》


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HepG2细胞建立IR模型后,分组同上。每个培养瓶中加入Trizol 1mL,利用Trizol法提取细胞总RNA,RNA定量后进一步逆转录成cDNA。建立PCR反应体系,其中ACC、FAS、SREBP-1c和apoB100及GAPDH引物序列见表1,以GAPDH为内参基因。反应条件:预变性95℃、10 min,变性95℃、10s,退火60℃、30s,共40个循环;熔解曲线为:从55℃到95℃,每隔10s增加0.5℃。使用LightCycler○R 480实时荧光定量PCR系统上机扩增,得出实验数据,根据2-ΔΔCt计算各基因的相对表达水平。