《表2 基因引物序列Table 2 Primer sequences of genes》

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《壳寡糖对氧化应激仔猪生长性能、抗氧化能力及空肠养分消化和转运能力的影响》

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采用实时荧光定量PCR技术检测空肠黏膜养分转运载体葡萄糖转运载体2（GLUT2）、钠/葡萄糖转运载体1（SGLT1）、碱性氨基酸转运载体1（SLC7A1）、中性氨基酸转运载体（NAAT）和碱性氨基酸转运载体7（SLC7A7）的mRNA相对表达量。组织中总RNA的提取和质量检测参照Chen等[13]的方法进行。c DNA的合成采用试剂盒（Prime ScriptTMReagent Kit，Ta KaRa，日本）进行，具体操作步骤参照说明书。登陆NCBI获得目的基因CDS序列，引物用Primer Premier 5.0软件进行设计，并在NCBI中进行BLAST比对引物特异性，筛选出特异性好的引物序列送华大基因生物科技有限公司进行合成，引物序列见表2。用实时定量PCR仪（ABI-7900）进行测定，RT-PCR反应体系为10μL:SYBR Premix Ex TaqTMⅡ（Ta KaRa，日本）5μL，上、下游引物各0.4μL，c DNA 1μL，dd H2O 3.2μL。PCR扩增条件为:95℃30 s；95℃5 s，60℃30 s，共40个循环；95℃15 s。内参基因为β-肌动蛋白（β-actin），相对荧光定量的计算采用2-ΔΔCt法[14]。