《表2 基因名称与引物序列Table 2 Gene names and primer sequences》

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《JNK1基因沉默对3T3-L1脂肪细胞高分子量脂联素表达的影响》

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Trizol法提取3T3-L1细胞总RNA，详细操作严格按照说明书进行。按RNA 1μg，5×Prime Script RT Master Mix 4μL，RNase-free H2O 15μL配置后混匀，37℃干浴15 min；85℃干浴5 s终止反应；c DNA置于-20℃保存。引物序列采用Primer 5.0软件设计（表2），按顺序加入96孔PCR板中。q PCR反应体系包括:2×Super Real Pre Mix Plus10μL、Forward Primer（10μmol/L）0.5μL、Reverse Primer（10μmol/L）0.5μL、RNase-free H2O 4μL、c DNA模板5μL。反应条件:95.0℃预变性15 min；95.0℃10 s，60.0℃35 s，40个循环。CFXConnect Real-Time System进行定量PCR。采用△△Ct计算各组基因相对表达量。