《表1 引物信息Primer Name and Sequence》

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《ANXA2真核表达载体的构建》


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注:下划线:酶切位点;斜体:增强子序列。

将连接好的载体转化入DH5α感受态细胞,用含有Amp抗性(Amp的浓度为100μg/mL)的LB平板37℃培养过夜。挑取阳性的振荡培养6 h,菌液PCR鉴定,菌液PCR的反应体系:rTaq(PremixTaq)10μL,菌液0.8μL,FP2 0.4μL,RP 0.4μL,ddH2O 8.4μL。反应条件:94℃5 min,94℃30 s,55℃30 s,72℃延伸2 min,25个循环,72℃延伸5 min,4℃保存[6]。含有目的条带的阳性菌液用质粒提取试剂盒提取。