《表2 引物序列及用途列表Table 2 Primer sequence and function list》

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《陆地棉干旱胁迫相关基因GhPR-10的克隆及表达分析》


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将培养至两叶一心的“KK1543”棉苗分别进行4℃低温、15%PEG、200 mmol/L Na Cl处理0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h后,依次提取3种胁迫下各个处理时期根、茎、叶的RNA,反转录成c DNA(反转录成c DNA时控制总RNA的量为3μg),以Gh UBQ7为内参基因通过实时荧光定量PCR进行检测分析,内参基因和Gh PR-10基因的荧光定量引物分别为Gh UBQ7-F和Gh UBQ7-R、Gh PR-10-q F和Gh PR-10-q R(表2)。采用全式金公司荧光定量试剂盒中说明书上的扩增体系,在ABI 7500 Fast荧光定量PCR仪进行实时定量PCR,每个PCR反应采用3次生物学重复。用2-△△Ct法进行分析,并制作柱形图显示该基因在不同胁迫处理下根、茎、叶的表达量变化。