《表2 引物序列Table 2 Primer sequences》

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《缺磷对茶树磷吸收及miR399a表达量的影响》


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试验采用Stem-loop RT-PCR的方法检测miR399a的表达量[30]。反转录引物的径环序列为5′-GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATT CGCACTGGATACGAC-3′,3′端加上与miR399a成熟序列5′-UGCCAAAGGAGAGUUGCCCUG-3′的3′端互补的6个碱基5′-CAGGGC-3′,形成反转录引物MIR399a-St-RT:5′-GTCGTATCCAGTG CAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGAC CAGGGC-3′。荧光定量PCR的正向引物取miR399a成熟序列的5′端15个碱基,然后在5′端上加上4个碱基5′-CGGC-3′,获得正向引物MIR399a-F:5′-CGGCTGCCAAAGGAGAGTT-3′。反向引物为反转录引物径环序列上的一段碱基,MIRNA-R:5′-GTGCAGGGTCCGAGGT-3′。荧光定量PCR的内参引物为U6-F和U6-R。以上引物序列见表2。