《表1 sh RNA-JNK1序列》
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《JNK1基因沉默对3T3-L1脂肪细胞高分子量脂联素表达的影响》
采用pll3.7慢病毒载体质粒构建JNK1-sh RNA慢病毒载体。根据JNK1序列设计sh RNA,在3'端引入XhoⅠ酶切位点,5'端引入HpaⅠ酶切位点,从Invitrogen公司合成sh RNA片段(表1)。分别经过溶解、退火、水浴、酶切、连接、转化、PCR鉴定等步骤。PCR引物序列:F:5'-TAGGCTTGGATTTCTATAA G-3',R:5'-GGAACCCTTAATATAACTTCGT-3'。挑取鉴定正确的阳性菌测序,测序引物为U6-S:5'-CAAGTGCAGGGGAAAGAATAGTAGAC-3'。详细步骤和操作方法请参考沈震等的研究报道(沈震等,2017)。
图表编号 | XD0022677300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.05.25 |
作者 | 童汪霞、唐友明、赵晓芳、刘旭东、吴银凤、吕萍 |
绘制单位 | 广西中医药大学附属瑞康医院、广西中医药大学附属瑞康医院、广西中医药大学附属瑞康医院、广西中医药大学附属瑞康医院、广西中医药大学附属瑞康医院、广西中医药大学附属瑞康医院 |
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