《表3 基因引物序列Table 3 Prim er sequences of genes》
将采集的瘤胃背囊组织在液氮环境下利用直径为8 cm的陶瓷研钵迅速磨成粉末状,取35~70 mg置于装有750μL Trizol的1.5 m L的EP管中,用匀浆仪(Polytron,PT 1200E)匀浆处理,提取总RNA[18]。提取的总RNA利用Ta KaRa公司的Prime ScriptT MRT reagent Kit w ith g DNA Eraser试剂盒反转录合成c DNA,并检测c DNA浓度。在NCBI上查找目的基因单羧酸转运蛋白1(monocarboxylate transporters 1,MCT1)、单羧酸转运蛋白4(mono-carboxylate transporters 4,MCT4)、阴离子交换蛋白2(anion exchanger 2,AE2)、腺瘤下调蛋白(down regulated in adenoma,DRA)、Na+/H+交换蛋白(Na+/H+exchange,NHR3)以及内参基因核糖体大亚基蛋白L13(ribosomal protein L13,Rp L13)的序列[15],利用Primer3在线设计引物(表3),由北京六合华大基因科技股份有限公司合成。采用荧光定量PCR仪,以合成的c DNA为模板进行定量分析,结果根据2-△△CT法计算。
图表编号 | XD0016366600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.08.01 |
作者 | 于胜晨、郝小燕、武晓东、丁娜、刁小高、项斌伟、张文佳、张建新 |
绘制单位 | 山西农业大学动物科技学院、山西农业大学动物科技学院、山西农业大学动物科技学院、山西农业大学动物科技学院、山西农业大学动物科技学院、山西省右玉县畜牧局、山西省右玉县畜牧局、山西农业大学动物科技学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |