《表2 引物序列信息Table 2 Prim er sequence inform ation》

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《21日龄断奶对仔猪肠道形态、肠道通透性及肠黏膜屏障的影响》


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空肠和回肠黏膜总RNA的提取采用试剂盒(QIAGEN),并用微量分光光度计(Bio-Drop)测定总RNA的纯度和浓度。按照试剂盒(PrimeScriptT MRT Reagent Kit w ith g DNA Eraser,Ta KaRa)操作步骤反转录合成c DNA。反应体系按照SYBR Premix Ex TaqT M试剂盒说明书配制。荧光定量PCR反应条件:95℃预变性30 s;95℃变性10 s;60℃退火延伸30 s,共40个循环;熔解曲线的制作参照荧光定量PCR仪(Bio-Rad CFX 96)操作说明书进行。基因的mRNA表达量采用2-ΔΔCt方法计算,以β-肌动蛋白(β-actin)作为内参基因,引物见表2,由英潍捷基贸易有限公司合成。