《表3 实时定量PCR引物序列Table 3 Prim ers for real-tim e q PCR》

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《富硒和过瘤胃胆碱新型添加剂对围产期奶牛生产性能及健康状况的影响》

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取肝脏组织样品采用RNAiso Plus提取总RNA；总RNA用Prime ScriptT MRT M aster M ix进行逆转录；以逆转录产物c DNA为模板，用试剂Premix TaqT M（Ta KaRa）进行引物验证；最后以逆转录产物c DNA为模板，利用试剂Ultra SYBR M ixture（北京康为世纪生物科技有限公司）实时定量PCR检测肝脏组织中细胞型谷胱甘肽过氧化物酶（GPx1）、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（GPx4）、微粒体甘油三酯转运蛋白（MTTP）和载脂蛋白B100（Apo B100）的mRNA相对表达量，以β-肌动蛋白（β-actin）为内参基因，采用2-△△CT法分析目的基因mRNA的相对表达量，具体操作参照叶耿坪等[16]的方法，所用引物序列见表3。