《表3 实时荧光定量PCR引物序列》

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参照反转录试剂盒（宝生物工程（大连）有限公司）说明书配制反转录混合液1和2。加入反转录混合液1及c DNA后在PCR仪上除去基因组DNA(42℃，2 min），随后加入反转录混合液2，经程序37℃15 min，85℃5 s完成反应。本试验采用10μL荧光定量PCR反应体系，包括1μL c D-NA，上下游引物各0.5μL，5μL SYBR Premix Ex Taq TM和3μL RNase Free H2O。反应循环条件为：95℃30 s，95℃10 s，60℃25 s，共40个循环，引物序列见表3，以β-actin作为内参基因进行计算组织中各基因的相对表达量。