《表2 实时荧光定量PCR引物序列Tab.2 Real-time PCR primer sequences》

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《Uhrf1与Dppa3相互作用调节印记基因的表达》

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Trizol法提取各处理细胞总RNA，反转录后获得c DNA。以GAPDH为内参基因，实时荧光定量PCR法检测各基因的相对表达量（内参基因和各基因的定量引物序列见表2）。反应体系如下:2×SYBR premix Ex Taq（10ul），primer（上下游各1μl），c DNA（1μl），Rox（1μl），加水补至20μl。反应条件为:[95℃3min，（95℃5s，60℃30s） ×40cycles]（扩增条件），95℃5 s，（60℃1 min，持续升温至95℃，荧光检测间隔为5℃）（融解曲线测定条件）。各检测基因的表达量变化以2-△△CT进行计算，P<0.05为显著，P<0.01为极显著。