《表1 NcGRA16和NcMYR2基因扩增引物》

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《新孢子虫GRA16和MYR2基因功能的初步研究》

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培养并纯化速殖子，提取总RNA，反转录合成cDNA，PCR扩增NcGRA16和NcMYR2基因，引物序列见表1，将扩增的目的基因克隆到pMD18-T载体，经双酶切后连接至pET-32a表达载体，经PCR、双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化表达菌DE3，经IPTG诱导后SDS-PAGE和Western blot鉴定表达蛋白。用Ni离子亲和柱对目的蛋白进行纯化，纯化蛋白经乳化后免疫BALB/c小鼠，3次免疫后采血，分离血清，于-20℃中保存。