《表1 JS16-80株全基因组扩增引物》

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《柯萨奇病毒A组2型江苏分离株(JS16-80)全基因组序列分析》

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用QIAamp Viral RNA Mini Kit（QIAGEN，Valencia，CA，USA）提取病毒核酸。使用PrimeScript TM One Step RT-PCR Kit Ver.2（TaKaRa，Dalian）试剂盒对CV-A2毒株全基因组序列进行扩增。采用分段法扩增CV-A2的全基因组，引物序列（表1）、扩增温度和步骤参见前期工作[9]。扩增后的阳性产物使用QIA-quick PCR purification kit（Qiagen，Valencia，USA）试剂盒纯化，然后分别使用上下游引物，按Big DyeTM Terminator V3.0Cycle Sequencing Ready reaction（Applied Biosystems，USA）试剂盒中的标记反应条件进行双向标记反应。标记产物经葡聚糖凝胶G-50（Pharmacia，Sweden）纯化后，于ABI3130型遗传分析仪上（Applied Biosystems，Japan）自动测序和分析。