《表1 全基因组扩增用引物序列》

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《犬瘟热病毒CDV-3株感染性克隆的构建与鉴定》

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取冻存的犬瘟热病毒CDV-3株细胞培养悬液200μL，根据RNeasy Mini Kit操作说明，提取总RNA。用Super ScriptⅢFirst-Strand Synthesis Super Mix试剂盒反转录合成c DNA。根据Gen Bank已公布的CDV-3株参考序列，用软件Primer Premier 5.0设计了13对特异性引物（表1），由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。用Trans Start Fast Pfu DNA聚合酶试剂盒进行PCR扩增，对目的片段进行回收纯化，连接至p EASY-Blunt载体，转化至Trans-T1感受态，涂菌至含有氨苄抗性的平板，筛选3个以上的阳性克隆子送生工生物工程（上海）股份有限公司进行序列测定。