《表1 en ENTV全基因组扩增引物序列》

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《山羊内源性鼻内肿瘤病毒enENTV-FJ1株全基因组测序及生物信息学分析》

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参考en ENTV-CHN1株（KU258881.1）基因组序列，利用Primer 6.0软件设计用于分段PCR扩增病毒全基因组序列的引物，由福州铂尚生物技术有限公司合成（表1）。取病羊肾脏研磨后的上清利用Ezup柱式动物基因组DNA抽提试剂盒提取总DNA，以其为模板，PCR分段扩增en ENTV的4个基因片段。PCR体系模板上样量为4 ng/μL，扩增程序：98℃10 s，55℃15 s，72℃30 s，共35循环；72℃10 min。PCR产物回收纯化后分别克隆至pMD19-T载体中，构建重组质粒，经PCR鉴定正确后，由福州铂尚生物技术有限公司测序鉴定。