《表1 TSWV全基因组扩增引物》

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TSWV为多分体RNA病毒，其基因组含有3条RNA链，为进一步验证上述结果，依据已公开的TSWV基因组序列，设计全基因组扩增引物，L RNA设计9对引物，M RNA设计5对引物，S RNA设计3对引物（表1），对3条RNA链分段进行克隆，通过相邻片段的重叠部分拼接获得全基因组序列（图1）。以获得的c DNA为模版进行PCR扩增。PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，按照扩增片段大小进行胶回收。回收产物连接到T载体上，连接产物转化至大肠杆菌感受态细胞当中，筛选阳性克隆，送至上海生工生物公司测序。