《表1 Ⅲ型DENV全基因组分段扩增的PCR引物》
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《Ⅲ型登革病毒在C6/36及Vero细胞中复制对其毒力的影响》
根据GenBank中登录的序列(KR296743),手动设计22对分段PCR引物,序列见表1,由北京擎科有限公司合成。提取P17-C6/36、P10-Vero毒种RNA,反转录合成cDNA,以其为模板扩增全长DENV基因组,PCR扩增条件为:94℃预变性5 min;94℃30 s,55℃30 s,72℃30 s,共35个循环;72℃再延伸7 min。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳分析。扩增成功序列送至昆明硕擎进行双向测序,测序引物为PCR扩增引物。所得序列采用BioEdit软件进行拼接,获得全长病毒基因组序列,并在NCBI在线数据库进行相似性检索。
图表编号 | XD00106199200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.20 |
作者 | 林垚、洪珊、王晓丹、陈俊英、潘玥、孙强明 |
绘制单位 | 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室、中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室、中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室、中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室、中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室、中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室 |
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