《表1 Ⅲ型DENV全基因组分段扩增的PCR引物》

《表1 Ⅲ型DENV全基因组分段扩增的PCR引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《Ⅲ型登革病毒在C6/36及Vero细胞中复制对其毒力的影响》


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根据GenBank中登录的序列(KR296743),手动设计22对分段PCR引物,序列见表1,由北京擎科有限公司合成。提取P17-C6/36、P10-Vero毒种RNA,反转录合成cDNA,以其为模板扩增全长DENV基因组,PCR扩增条件为:94℃预变性5 min;94℃30 s,55℃30 s,72℃30 s,共35个循环;72℃再延伸7 min。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳分析。扩增成功序列送至昆明硕擎进行双向测序,测序引物为PCR扩增引物。所得序列采用BioEdit软件进行拼接,获得全长病毒基因组序列,并在NCBI在线数据库进行相似性检索。