《表1 分段扩增waxy基因的引物》

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《waxy基因功能标记开发及在糯玉米育种中的应用》

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分别取10粒自交系昌7-2和糯玉米自交系云539的种子在光温培养箱中培养14d，采集幼嫩叶片，采用简化CTAB法[23-25]快速提取基因组DNA。从NCBI(http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/）网站下载玉米显性非糯质基因Wx的碱基序列（Gen Bank No.:X03935），利用Primer 5.0软件，在相对保守的外显子区域设计特异的PCR引物（表1），分段扩增糯玉米自交系云539的隐性糯质基因wx和普通玉米自交系昌7-2的显性非糯质基因Wx，扩增产物由北京六合华大基因科技有限公司进行PCR产物的测序。利用Bioedit软件进行序列拼接与比对，发掘显性Wx基因与隐性wx基因序列差异。根据序列差异，寻找引起显性Wx基因功能变异的功能基序。在功能基序的两侧利用Primer 5.0软件设计引物，开发1对共显性功能标记。