《表1 扩增的基因引物信息》

《表1 扩增的基因引物信息》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《石柑子不同提取部位对RAW264.7细胞炎症的影响》


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用含有10%FBS的DMEM培养基将对数生长期的细胞配成细胞悬液,以约3×105个/孔细胞单位将细胞悬液分别加入到6孔板中,孵育48h后,开始加入药物,每个药物3个平行孔,继续孵育24h,采用TRIzol法提取RNA并纯化,运用RT-q PCR法检测i NOS和COX-2的表达,将9.5μl的灭菌超纯水,1μl的c DNA,各1μl的特异性引物F、R(终浓度均为1μmol/L)和12.5μl的MaximaTMSYBR Green/Fluorescein q PCR MasterMix(2×)共混合成25μl后放入定量PCR仪中进行扩增,扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸50s,共45个循环;72℃延伸7min。程序运行结束后,记录Ct值,计算各组基因的相对表达量(注:采用2-△△Ct法)。