《表2 基因片段PCR扩增的引物信息》

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《基于叶绿体DNA片段的槭属鸡爪槭组系统进化和生物地理学研究》

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每份样品取约0.2 g干燥叶片，全基因组DNA的提取使用植物基因组DNA提取试剂盒（TIANGEN Beijing China）。依据本课题组前期对于鸡爪槭高分辨率DNA条形码的筛选结果，选取叶绿体基因片段psb A-trn H、rpl16和trn L-trnF作为本研究的遗传片段[4]。叶绿体基因片段的PCR扩增均在LabnetMultiGeneTM96-well Gradient Thermal Cycler上完成。PCR反应体系为20μL，包含DNA模板1μL、Taq PCR Master Mix（莱枫，上海）10μL、正反引物各1μL（表2）、二次水（ddH2O）7μL。PCR反应程序为:94℃预变性3 min；94℃变性30 s，52—58℃退火30 s，72℃延伸60 s，共30个循环；最后72℃延伸10 min。PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测并纯化后，送往北京生工生物工程股份有限公司在ABI3730XL遗传分析仪上进行双向测序。