《表1 目的片段PCR扩增引物》

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《伯氏疟内质网塑形蛋白SEY1敲除质粒的构建及转染》

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以野生型伯氏疟原虫Pb Sey1基因的编码区（1-2742bp）为模板，分别扩增两个片段Segment I (S I，26-1059bp）和Segment II (S II，1050-1958bp），并在两个片段上下游分别引入Kpn I、Eco RV和Kpn I、Not I酶切位点（PCR引物见表1）。PCR条件为：94℃预变性30 s，以98℃10 s，58℃1 min，68℃1 min，循环35次，68°C 5 min，4°C终止反应。琼脂糖凝胶电泳确定PCR产物片段大小正确后切胶回收，再将片段S II经Kpn I、Not I酶切，酶切产物纯化后备用。