《表1 MTHFR目的基因引物及扩增片段长度》

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《MTHFR基因多态性在台州地区原发性男性不育症中的研究》


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MTHFR基因多态性检测:采集不育组和对照组男性1~2ml外周血,EDTA抗凝。用DNA提取试剂盒(TIANamp Blood DNA Kit DP318,北京天根生化)提取DNA,应用ABI Stepone Plus实时荧光定量PCR仪(应用生物系统公司,美国)、MTHFR基因检测试剂盒(江西诺德)进行荧光定量PCR,检测MTHFR C677T和A1298C位点的基因多态性。引物系列见表1。PCR扩增程序:95℃总变性5min,95℃变性45s,60℃退火45s,72℃延伸45s,35个循环,72℃延伸10min。