《表1 耐药基因的PCR扩增引物》

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《社区和医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及耐消毒剂基因的检测》

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根据参考文献[7-9]合成四环素耐药基因（tetM）、大环内酯类耐药基因（ermA、ermC）、氨基糖苷类耐药基因（aac(6'）/aph（2″）、aph（3'）-Ⅲ)的PCR反应引物（表1），细菌DNA的提取按照试剂盒的说明书进行。通过PCR方法对5种耐药基因进行扩增反应，总反应体系为20μL，Premix溶液（包含Taq酶、Mg2+、d NTPs等）10μL，扩增引物各1.0μL，模板DNA 2μL，灭菌双蒸水补足20μL；PCR扩增参数:94℃预变性3 min，94℃变性60 s，55℃退火60 s，72℃延伸60 s，35个循环，最后72℃延伸5 min。采用1.5%琼脂糖凝胶（含溴化乙锭）对扩增产物进行电泳，确定菌株是否含有相应耐药基因。