《表1 各基因PCR扩增的特异性引物序列》

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《滋阴养血安神方联合针刺对PCPA诱导的失眠小鼠肝脏TNF-α表达影响》


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对氯苯丙氨酸(para-chlorophenylalanine,PCPA,Alfa Aesar公司,批号:ZO1B007);滋阴养血安神方:酸枣仁25 g,五味子5 g,刺五加25 g,龙眼肉25 g,远志15 g,茯苓25 g(购于辽宁中医药大学附属医院药房,批号分别为:1711203、1706211、111575、1712261、1802091、1711031),兑换为小鼠给药剂量,并摸索剂量设低、中、高剂量组。常规方法煎煮制成药物按1.82、3.64、7.28 g/mL低、中、高3种浓度,分装后4℃备用,灌胃时每只每日给药0.8 m L/20 g体质量;TNF-α抗体(Abcam公司,货号Ab109364);Western及IP细胞裂解液(南京凯基生物科技发展有限公司,货号KGP701);Invent总蛋白提取试剂盒(美国Invent SD001/SN002);SDS-PAGE凝胶电泳试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司,货号KGP113);BCA蛋白含量检测试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司,货号KGP903);GAPDH内参抗体(Abcam公司,货号Ab181602);羊抗兔二抗(Abkkine公司,货号A23920);ECL检测试剂盒(德国Millopore WBKLS0100);Trizol总RNA提取试剂(北京康为世纪生物有限公司,货号CW0580S);HiFiScript cDNA Synthesis Kit(北京康为世纪生物有限公司,货号CW2582);UltraSYBR Mixture(Low ROX)(北京康为世纪生物有限公司,货号2601M) ;引物(南京金瑞斯生物科技有限公司)。由公司合成引物如表1所示。