《表1 PCR扩增毒力基因引物序列》

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《致多部位感染肺炎克雷伯菌的毒力分析》

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引物合成由上海生工公司合成，引物序列见表1。DNA模板提取：500mL无菌水的EP管中取一菌环菌落混匀，100℃15min，8 000r/min，离心5min，上清即为DNA。PCR扩增荚膜血清型和毒力基因：反应体系为25.0μL，EX-Taq酶12.5μL、蒸馏水5.0μL、正向和反向引物各2.5μL、待测样本5.0μL。反应条件为95℃、预热3min，94℃变性40s、43～60℃退火30～60s、70℃延伸60s，共30循环后72℃延伸7min。PCR扩增产物在1%琼脂糖凝胶电泳120V30min，经凝胶成像系统观察结果[2-3，9]。