《表1 毒力基因PCR扩增引物序列》

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《云南省梁河县家鼠鼠疫疫源地中致病性耶尔森菌的调查》

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挑取适量上述可疑菌落对其进行caf1、fox A、ail及inv基因的菌落PCR初筛[9]。PCR反应体系配制:premix 12.5μl，上、下游引物各0.5μl，纯水10.5μl。扩增参数:95℃预变性5 min，94℃变性15 s、57℃退火15 s、72℃延伸30 s，扩增25个循环，72℃延伸5 min，扩增结束后1.5%琼脂糖凝胶（加入Goldview染料，浓度是5μl/100 ml）电泳，在紫外灯下获取结果。caf1基因阳性初步判定为鼠疫耶尔森菌，单独fox A阳性初步判定为小肠结肠炎耶尔森菌，fox A与ail皆阳性初步判定为致病性小肠结肠炎耶尔森菌，而inv阳性则判定为假结核耶尔森菌。引物及扩增条件见表1。